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使用反相c18色譜柱前要做些什么

更新時(shí)間:2022-11-22瀏覽:984次

  反相c18色譜柱是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相,極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動(dòng)相,根據(jù)溶質(zhì)極性(疏水性)的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。使用前,須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速?zèng)_洗,作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈?zhǔn)嬲梗股V柱的性能達(dá)到狀態(tài)。具體操作是,將配制好65%的乙腈/水沖洗后,把色譜柱進(jìn)口端連接在色譜儀上,出口端放空(不可連上檢測器,以免污染了檢測器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干,過20分鐘后再接上檢測器,以1.0ml/min的流速,繼續(xù)沖洗2~8小時(shí);

 
  產(chǎn)品特點(diǎn)
 
  1.通用柱,經(jīng)典品牌。
 
  2.質(zhì)控嚴(yán)格,重現(xiàn)性好。
 
  3.高純硅膠,性能佳。
 
  4.中低價(jià)位,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。
 
  c18反相液相色譜柱的固定相疏水性較強(qiáng),在使用過程中盡量不要使用高水相條件,若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的負(fù)面影響;由于碳載量高,表現(xiàn)尤為明顯,建議使用過程中水相比例不超過90%。
 
  反相介質(zhì)的商品種類繁多,其中代表性的是以硅膠為載體,通過表面鍵合非極性分子層制備。通過控制反應(yīng)時(shí)間和溫度,可獲得性能穩(wěn)定的反相介質(zhì)。在硅膠基質(zhì)的反相填料中,以鍵合有C18、C8、C2的球形多孔填料為常見。在反相色譜中,采用高溶劑強(qiáng)度、低極性的流動(dòng)相時(shí)可獲得較低的保留值。固定相的不同也可以導(dǎo)致選擇性發(fā)生變化,氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的選擇性有很大差異,一般應(yīng)優(yōu)先考慮C8柱、C18柱,然后是氰基柱,再次是苯基柱。

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