手性色譜柱（Chiral HPLC Columns）是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相（Chiral Stationary Phases）。

通過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節、優化流動相和溫度以達到佳分離效果。

參考Irving Wainer的分類方法，根據固定相的化學結構，將手性色譜柱分為以下幾種：

1、刷（Brush）型或稱為Prikle型

刷型手性色譜柱的出現和發展源于Bill Prikle及其同事的工作。刷型手性色譜柱是根據三點識別模式設計的，優勢在于其易于合成。另外，刷型固定相具有高的容量因子，因此具有高的選擇因子。它的不利之處在于它僅對芳香族化合物有效，有時不得不進行衍生化反應。

2、纖維素（Cellulose）型

纖維素型手性色譜柱的分離作用包括相互吸引的作用及形成包埋復合物。這種類型的手性色譜柱主要的制造商之一是日本的Daicel公司，他們生產的纖維素酯和氨基甲酸纖維素柱可以分離多種生物堿和藥物。

3、環糊精（Cyclodextrin）型 

環糊精是通過Bacillus Macerans 淀粉酶或環糊精糖基轉移酶水解淀粉得到的環型低聚糖。通過控制環糊精轉移酶的水解反應條件可得到不同尺寸的環糊精。

4、大環抗生素（Macrocyclic antibiotics）型

大環抗生素型手性色譜柱是近發展起來的，通過將大環抗生素鍵合到硅膠上制成的新型手性色譜柱。大環抗生素型手性色譜柱的出現歸功于Dan Armstrong的貢獻。此類色譜柱常用的大環抗生素主要由三種：利福霉素（Rifamycin），萬古霉素（Vancomycin），替考拉寧（Ticoplanin）。

5、蛋白質（Protein）型 

6、配位交換（|Ligand exchange）型

手性配位交換色譜（Chiral Ligand Exchange Chromatography，CLEC）由Davankov發明，是通過形成光學活性的金屬絡合物而達到手性分離，屬于Irving Wainer分類中的第4類手性固定相，主要用于分離氨基酸類。

7、冠醚（Crown ethers）型